厭氧培養(yǎng)箱是一種在無氧環(huán)境條件下進行細菌培養(yǎng)及操作的專用裝置。它能提供嚴格的厭氧狀態(tài)恒定的溫度培養(yǎng)條件和具有一個系統(tǒng)化、科學化的工作區(qū)域。在本裝置內操作培養(yǎng),可以培養(yǎng)最難生長的厭氧生物,又能避免以往厭氧生物在大氣中操作時接觸氧而死亡的危險性。因此本裝置是厭氧生物檢測科研的理想工具。本裝置也是一物多用的良好儀器,如改變操作方式,為微需氧菌的生長繁殖提供良好的生長條件。厭氧培養(yǎng)箱內厭氧環(huán)境形成是這樣的:
1.按使用要求放置好必要的附件和器具,并向操作室內放入二個無毒塑料袋;
2.通電源開照明燈,開溫控儀,調節(jié)所需溫度及安全溫度;
3.操作室內放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示劑(封閉);
4.關緊取樣室內外門,并抽真空校驗;
5.操作室內第一次置換(氮氣置換):
A.先用橡皮管插入操作室內進氣口,另一頭插入塑料袋;
B.接通氮氣進氣路,打開氮氣控制閥1,使二只塑料袋充足氮氣,關閉閥門1,然后扎緊袋口;
C.把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊;
D.把塑料袋內氮氣漸漸放于操作室內,至全部放出。
6.操作室第二次置換(氮氣置換)重復一次充氮過程,取樣室先抽真空,并注意隨時用腳踏開關開閉排氣。
7.操作室第三次置換(混合氣體置換):(混合氣體配比為N285%、H210%、CO25%)
A.調換氣路打開混合氣閥3進氣,充氣時取樣室先抽真空,并隨時用腳踏開關開閉排氣;
B.混合氣充滿塑料袋后,關掉混合氣閥并打開閥5,使混合氣經過流量計,調整流量計,流量為每分鐘10ml左右;
C.把塑料袋內混合氣漸漸排于操作室內;
D.通過三次換氣后,操作室內氣體含氧量已處于極微量狀態(tài)。
8.操作室內打開粑粒除氧劑,接通除氧催化器電源進行催化除氧,一小時后開美蘭指示劑(美蘭安瓶)觀察其變色情況,不變色為操作室內達到厭氧環(huán)境;
9.開紫外線滅菌燈,室內進行滅菌處理,滅菌時間按具體實驗自定。